胰高血糖素样肽1(28-36)酰胺靶向线粒体相关途径抑制转化生长因子β介导的肺成纤维细胞活化
董泽海1
侯思彤1
赏霖骄2
刘雨欣2
吕晓希2
于洋1
王晓霞1
1.北京医院内分泌科 国家老年医学中心 中国医学科学院北京协和医学院研究生院,北京 1007302.呼吸和共病全国重点实验室 中国医学科学院北京协和医学院药物研究所,北京 100050
摘要：目的 探讨胰高血糖素样肽1(GLP-1)代谢片段GLP-1(28-36)酰胺对转化生长因子β(TGF-β)介导的肺成纤维细胞增殖和活化的影响及可能的作用机制.方法 取小鼠肺成纤维细胞(MLg细胞)分为对照组、TGF-β组、TGF-β+利拉鲁肽组、TGF-β+GLP-1(28-36)酰胺组,通过蛋白质印迹法检测MLg细胞Smad同源物3(SMAD3)磷酸化水平;细胞计数试剂盒8法检测MLg细胞增殖情况;通过带生物素标记的GLP-1(28-36)酰胺[BIOT(28-36)]和链霉素琼脂糖对MLg细胞裂解物进行配体垂钓;对垂钓得到的蛋白样品进行高效液相色谱-串联质谱分析;根据质谱分析数据筛选丰度前100的蛋白进行生物信息学分析,进一步筛选可能与GLP-1(28-36)酰胺相互结合的蛋白;通过Autodock vina1.5.6软件进行分子对接初步验证蛋白之间的结合.结果 与对照组比较,TGF-β组MLg细胞SMAD3磷酸化水平升高(P＜0.01)、细胞增殖率上升(P＜0.05).与TGF-β组比较,TGF-β+GLP-1(28-36)酰胺组MLg细胞SMAD3磷酸化水平下降[(0.677±0.046)比(1.414±0.037)](P＜0.05),增殖率差异无统计学意义(P＞0.05).生物信息学分析筛选得到线粒体蛋白YME1样1ATP酶(YME1L1)、磷酸甘油酸变位酶5(PGAM5)、线粒体翻译延伸因子Tu(TUFM)、热休克蛋白家族D成员1(HSPD1)、溶质载体家族25成员5(SLC25A5)可能与GLP-1(28-36)酰胺相互结合.Autodock vina1.5.6软件进行分子对接并使用Pymol 3.1软件可视化处理,验证上述蛋白与GLP-1(28-36)酰胺的 Docking Score 均＜-4 kcal/mol.结论 GLP-1(28-36)酰胺能抑制 TGF-β 介导的肺成纤维细胞活化,其可能是通过线粒体相关途径发挥作用的,能与GLP-1(28-36)酰胺直接结合的蛋白可能是 YME1L1、PGAM5、TUFM、HSPD1、SLC25A5 等线粒体蛋白.
关键词：胰高血糖素样肽1(28-36)酰胺肺纤维化转化生长因子β线粒体配体垂钓
分类号：R563(呼吸系及胸部疾病)
论文发表日期：2025-04-18
在线出版日期：2026-09-14（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 535-538 )
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