长链非编码RNA DLGAP1-AS2在肾透明细胞癌中的作用机制与预后价值
乔丽文
王惠明
武汉大学人民医院肾病内科,武汉 430060
摘要：目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)DLGAP1-AS2在肾透明细胞癌(ccRCC)中的作用及分子机制,以及DLGAP1-AS2表达在ccRCC患者中的预后价值.方法 首先分别在人肾小管上皮细胞系HK-2和人ccRCC细胞系786-O中检测DLGAP1-AS2的表达水平,随后,通过细胞转染技术将过表达DLGAP1-AS2(Ov-DLGAP1-AS2)和过表达对照物(Ov-NC)转染到人ccRCC细胞系786-O细胞中,并检测细胞增殖活性和免疫逃逸能力的变化.检测Ov-DLGAP1-AS2对786-O细胞中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路成员表达的影响.使用PI3K/Akt/mTOR通路激动剂740Y-P刺激786-O细胞,进一步探讨DLGAP1-AS2的作用机制.最后,在ccRCC患者中进行生存分析,并构建基于DLGAP1-AS2的ccRCC患者预后判断列线图.结果 786-O细胞中DLGAP1-AS2表达水平低于HK-2细胞[(0.50±0.08)比(0.95±0.05)](P=0.002).接种细胞48、72 h后,Ov-DLGAP1-AS2组细胞增殖活性低于Ov-NC组和对照组(均P<0.05).Ov-DLGAP1-AS2组细胞上清液中可溶性人程序性死亡配体1(sPD-L1)浓度低于Ov-NC组和对照组(均P<0.05),将786-O细胞与T细胞共培养后,Ov-DLGAP1-AS2/T组细胞上清液中γ干扰素、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素2(IL-2)浓度高于Ov-NC/T组和T细胞组(均P<0.05).Ov-DLGAP1-AS2组中PI3K、Akt和mTOR的表达水平低于Ov-NC组和对照组(均P<0.05).加入740Y-P刺激786-O细胞,接种细胞48、72 h后,Ov-DLGAP1-AS2+740Y-P组细胞增殖活性高于Ov-DLGAP1-AS2组(均P<0.05),且Ov-DLGAP1-AS2+740Y-P组细胞上清液中sPD-L1的浓度高于Ov-DLGAP1-AS2组,与T细胞共培养后,Ov-DLGAP1-AS2/T+740Y-P组细胞上清液中γ干扰素、TNF-α、IL-2浓度低于Ov-DLGAP1-AS2/T组(均P<0.05).Kaplan-Meier生存曲线表明DLGAP1-AS2高表达患者预后差于DLGAP1-AS2低表达患者(Log-rank P<0.001),且DLGAP1-AS2高表达为ccRCC患者预后的独立危险因素(均P<0.05).基于DLGAP1-AS2构建了列线图,经验证可以较好地预测ccRCC患者生存率.结论 过表达DLGAP1-AS2能够通过抑制PI3K/Akt/mTOR通路,抑制786-O细胞的增殖活性和免疫逃逸.DLGAP1-AS2高表达预示ccRCC患者预后不良.DLGAP1-AS2是ccRCC潜在的治疗靶点和预后标志物.
关键词：肾透明细胞癌长链非编码RNA DLGAP1-AS2免疫逃逸磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路
分类号：R736(内分泌腺肿瘤)
论文发表日期：2023-10-08
在线出版日期：2026-09-14（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1494-1498 )
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