磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白自噬通路在支气管肺发育不良中的作用
成小蓉
刘蕊蕊
潘飞飞
黄栋
贵州医科大学附属人民医院 贵州省人民医院儿童重症医学科,贵阳 550002
摘要：目的 探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)自噬通路在支气管肺发育不良中的作用.方法 将A549 细胞(腺癌人类肺泡基底上皮细胞)一定条件培养后分成对照组、支气管肺发育不良组、雷帕霉素干预组.支气管肺发育不良组、雷帕霉素干预组高氧环境培养,置于37℃、85%氧气孵化箱中培养48 h,前者不加药剂、后者加10 μmol/L的雷帕霉素干预;对照组常规环境培养,置于37℃、5%二氧化碳孵化箱中培养48 h,不加药剂.利用高氧构建支气管肺发育不良的细胞模型,利用蛋白质印迹实验和实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)实验验证自噬对高氧处理后A549 细胞肺泡表面标志物合成蛋白复合物(SPC)、水通道蛋白5(AQP5)的影响,利用5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)实验检测自噬对高氧处理后A549 细胞增殖的影响,利用蛋白质印迹实验验证PI3K/Akt/mTOR自噬通路在支气管肺发育不良中的作用.结果 蛋白质印迹实验和RT-qPCR实验表明自噬激活剂雷帕霉素挽救了高氧处理后A549 细胞SPC、AQP5 表达的下调.EdU实验表明雷帕霉素显著促进了高氧处理后A549 细胞的增殖,EdU阳性细胞百分比高于支气管肺发育不良组[(0.48±0.06)比(0.36±0.02)](P<0.05).蛋白质印迹实验显示雷帕霉素干预后的A549 细胞中的磷酸化-PI3K、磷酸化-Akt、磷酸化-mTOR、自噬选择性底物P62 的表达水平显著降低,微管相关蛋白 1 轻链 3 的表达水平显著上升(均P<0.05).结论 PI3K/Akt/mTOR自噬通路在支气管肺发育不良中发挥着重要作用.
关键词：支气管肺发育不良磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路自噬雷帕霉素
分类号：R563(呼吸系及胸部疾病)
论文发表日期：2023-08-08
在线出版日期：2026-09-14（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1165-1169 )
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