分泌人共刺激分子B7-2的重组卡介苗的构建及表达与鉴定
王靖宇1
韩瑞发2
马腾骧2
王东文1
1.山西医科大学第一医院泌尿外科,太原,0300012.天津市泌尿外科研究所
摘要：目的 构建分泌表达人共刺激分子B7-2(hB7-2)的重组卡介苗(rBCG).方法 采用聚合酶链反应(PCR)以含hB7-2的质粒为模板扩增出hB7-2活性序列,利用基因重组技术插入pYL-MCS质粒构建出分泌型卡介苗穿梭表达载体pYL-hB7-2.用电穿孔方法将该质粒转入卡介苗得到rBCG,利用PCR扩增和测序检测其hB7-2的DNA表达,分别SDS-PAGE和ELISA法测定rBCG上清液中和菌内hB7-2蛋白.结果 酶切鉴定、PCR扩增和DNA测序均表明rBCG含有的hB7-2 DNA与文献结果一致,SDS-PAGE检测出有相应蛋白表达,ELISA法测定rBCG上清液中分泌的B7-2蛋白为3.8 U/ml.结论 构建的重组BCG可以分泌表达人共刺激分子hB7-2,能够提供激活免疫反应的共刺激信号,将会成为膀胱肿瘤免疫治疗的一种新型方法.
关键词：膀胱肿瘤卡介苗共刺激分子基因重组
分类号：R737.14(泌尿生殖器肿瘤)
资助基金：天津市科学技术成果(20040131)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2026-09-14（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 944-946 )
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