N-myc下游调控基因1加重氧糖剥夺脑微血管内皮细胞铁死亡的作用研究
黄海锋
高玉元
段青蕊
王丽娟
510080 广州,南方医科大学附属广东省人民医院(广东省医学科学院)神经科
摘要：目的 探究N-myc下游调控基因 1(N-myc downstream regulated gene 1,NDRG1)对氧糖剥夺(oxygen-glu-cose deprivation,OGD)诱导的小鼠脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMVEC)铁死亡的影响.方法 提取并培养小鼠原代BMVEC,电镜观察氧糖剥夺后原代BMVEC线粒体形态.体外培养bEnd.3细胞,分为对照组、模型组(构建OGD模型)、小干扰RNA阴性对照(si-NC)组、NDRG1干扰RNA(si-NDRG1)组、阴性对照造模(OGD+si-NC)组、NDRG1 干扰造模(OGD+si-NDRG1)组(n=3).模型组、OGD+si-NC 组和 OGD+si-NDRG1 组构建 OGD 模型,si-NC 组和 OGD+si-NC 组进行 si-NC 转染,si-NDRG1 组和 OGD+si-NDRG1 组进行si-NDRG1转染,检测各组细胞活力、丙二醛、谷胱甘肽、Fe2+水平、脂质过氧化水平、NDRG1、谷胱甘肽过氧化物酶 4(glutathione peroxidase 4,GPX4)及酰基辅酶 A 合成酶长链家族成员 4(acyl-CoA synthetase long-chain family member 4,ACSL4)蛋白水平.结果 与对照组比较,模型组OGD处理后的细胞贴壁数量显著减少,胞质出现肿胀现象,细胞活力显著降低[(37.68±2.43)％vs(96.34±12.08)％,P＜0.05],GPX4 明显下调(0.78±0.02 vs 1.15±0.01,P＜0.01),ACSL4(1.45±0.04 vs 0.78±0.12,P＜0.01)、NDRG1 蛋白表达明显上调(1.22±0.01 vs 0.13±0.01,P＜0.01).si-NDRG1组GPX4、NDRG1蛋白表达明显低于si-NC组,ACSL4、谷胱甘肽蛋白表达明显高于si-NC组,差异有统计学意义(P＜0.05).OGD+si-NC组GPX4蛋白表达及谷胱甘肽水平明显低于si-NC组和si-NDRG1组,NDRG1、ACSL4蛋白表达、丙二醛、Fe2+相对荧光强度、氧化型脂质相对荧光强度明显高于si-NC组和si-NDRG1组,差异有统计学意义(P＜0.05).OGD+si-NDRG1组GPX4蛋白表达及谷胱甘肽水平明显低于si-NC组和si-NDRG1组,NDRG1明显低于si-NC组,明显高于si-NDRG1组,ACSL4、Fe2+相对荧光强度明显高于si-NC 组和 si-NDRG1 组(P＜0.05).OGD+si-NDRG1 组 NDRG1、ACSL4、丙二醛、Fe2+相对荧光强度、氧化型脂质相对荧光强度明显低于OGD+si-NC组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 降低NDRG1可以通过改善铁代谢和脂质过氧化,减轻OGD诱导的微血管内皮细胞铁死亡.
关键词：卒中铁死亡内皮细胞缺氧缺血脑基因myc
资助基金：国家自然科学基金(81974195)国家自然科学基金(82101377)国家自然科学基金(82371249)国家自然科学基金(82471257)广东省科技计划项目(2020A0505140006)广州市科技计划项目(202201000005)广东医学科学技术研究基金项目(A2021308)广东医学科学技术研究基金项目(A2022092)
论文发表日期：2025-06-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 798-803 )
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