对羟基苯甲醛对氧糖剥夺/复氧模型脑微血管内皮细胞的保护作用
肖湉
杨丽萍
陈普
段小花
650500 昆明,云南中医药大学民族医药学院云南省傣医药与彝医药重点实验室
摘要：目的 研究对羟基苯甲醛对氧糖剥夺/复氧损伤小鼠脑微血管内皮细胞(bEnd.3)的保护作用.方法 对羟基苯甲醛(500、250、125、62.5、31.25、15.63μmol/L)给药36 h,三气培养箱培养复制bEnd.3氧糖剥夺/复氧损伤模型,设置正常组、模型组、高剂量组、低剂量组、抑制剂组.相关试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、NO、TNF-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、ATP水平及线粒体关键ATP酶(Na+/K+-ATPase、Mg2+-ATPase、Ca2+-ATPase、Ca2+/Mg2+-ATPase)活性.Western blot法检测bEnd.3细胞磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/内皮型一氧化氮合酶信号通路相关蛋白.结果 细胞存活率筛选出高剂量组250μmol/L、低剂量组125μmol/L作为实验条件.与正常组比较,模型组NO、Na+/K+-ATPase、Mg2+-ATPase、Ca2+-ATPase、Ca2+/Mg2+-ATPase活性、ATP水平明显降低,TNF-α、IL-1β、IL-6、LDH水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).与模型组比较,高剂量组和低剂量组NO、Ca2+-ATPase活性明显升高,LDH水平明显降低(P<0.05);高剂量组Na+/K+-ATPase、Mg2+-ATPase、Ca2+/Mg2+-ATPase活性、ATP水平明显升高,TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).与正常组比较,模型组磷酸化Akt、磷酸化内皮型一氧化氮合酶表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).与高剂量组比较,抑制剂组磷酸化Akt、磷酸化内皮型一氧化氮合酶表达明显降低(0.80±0.05 vs 0.93±0.08,1.23±0.36 vs 1.72±0.10,P<0.05).结论 对羟基苯甲醛能有效保护氧糖剥夺/复氧损伤的bEnd.3,其药理机制与磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/内皮型一氧化氮合酶信号通路有关.
关键词：脑缺血内皮细胞一氧化氮合酶肿瘤坏死因子α磷酸肌醇3-激酶类蛋白激酶类
资助基金：国家自然科学基金(81960733)云南省科技计划项目(2019FB120)
论文发表日期：2022-11-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1201-1205 )
英文信息