小泛素样修饰蛋白特异性蛋白酶1介导糖尿病性血管内皮细胞损伤修复的研究
李萍1
李丽丽2
李艳霞3
马晓芳3
边希云3
肖晓琳3
张春艳4
刘凤婷5
刘晓智3
1.300450 天津市第五中心医院康复理疗科2.天津市肿瘤医院骨与软组织肿瘤科3.300450 天津市第五中心医院中心实验室4.天津市滨海新区中医医院药学科5.中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津市放射医学分子核医学重点实验室
摘要：目的 利用小泛素相关修饰体(SUMO)特异性蛋白酶1(SENP1)解离过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)的小泛素样修饰蛋白1(SUMO1)修饰.方法 人脐静脉内皮细胞培养传代后分对照组、高糖组及SENP1组;Western blot法检测SENP1、SUMO1、PGC-1α和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)水平;实时荧光定量PCR检测线粒体转录因子A(TFAM)、核呼吸因子2α(NRF-2α)和雌激素受体相关受体α(ERRα)的mRNA表达;ELISA测定乳酸脱氢酶(LDH);细胞划痕愈合方法、Transwell方法和体外血管模拟形成实验分别检测细胞自愈、迁移和形成血管拟态的能力.结果 与对照组比较,高糖组共价SUMO1、PGC-1α和活化Caspase-3蛋白表达明显升高,SENP1蛋白表达明显降低,TFAM、NRF-2α和ERRα的mRNA表达明显降低,细胞划痕修复能力及模拟血管形成能力下降(P＜0.05,P＜0.01).与高糖组比较,SENP1组SENP1蛋白表达明显升高,共价SUMO1、PGC-1α和活化Caspase-3蛋白表达明显降低,TFAM、NRF-2α和ERRα的mRNA表达明显升高,细胞划痕修复和迁移能力及模拟血管形成能力明显改善(P＜0.05,P＜0.01).对照组、高糖组和SENP1组细胞上清液中LDH水平比较,差异有统计学意义[(24.66±6.39)ng/ml vs (302.45±30.54)ng/ml vs (174.08±21.03)ng/ml,P＜0.01].结论 SENP1能够诱导PGC-1α发生去SUMO修饰,解除其对PGC-1α下游转录因子的抑制作用,改善线粒体功能,抑制高糖诱导的血管内皮细胞功能损伤作用.
关键词：SUMO1蛋白过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3核呼吸因子类L-乳酸脱氢酶
资助基金：国家自然科学基金(81471175)国家自然科学基金(81501073)天津市滨海新区卫生计生委科技项目(2015BWKY001)
论文发表日期：2020-04-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 414-418 )
英文信息