p300/CBP相关因子对大鼠血管平滑肌细胞迁移的影响及机制研究
邱立强
夏豪
江洪
徐昌武
1.430060 武汉大学人民医院心血管内科 心血管病湖北省重点实验室 武汉大学心血管病研究所2.430060 武汉大学人民医院心血管内科 心血管病湖北省重点实验室 武汉大学心血管病研究所3.430060 武汉大学人民医院心血管内科 心血管病湖北省重点实验室 武汉大学心血管病研究所4.430060 武汉大学人民医院心血管内科 心血管病湖北省重点实验室 武汉大学心血管病研究所
摘要：目的 探讨p300/CBP相关因子(PCAF)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)迁移的作用及机制.方法 组织块贴壁法获取大鼠原代VSMC,使用Ad-PCAF RNAi腺病毒转染VSMC以下调PCAF表达.选择1μg/ml的脂多糖作为VSMC迁移诱导剂.将实验分为4组:不添加脂多糖(对照组)、1μg/ml脂多糖刺激(A组)、Ad-绿色荧光蛋白(GFP)腺病毒转染+1 μg/ml脂多糖刺激(B组)、Ad-PCAF RNAi腺病毒转染+1 μg/ml脂多糖刺激(C组).采用Transwell实验检测细胞迁移水平.免疫荧光染色实验检测VSMC中NF-κB p65的核转位情况.Western blot检测PCAF、NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65蛋白表达水平.结果 Western blot结果显示,与对照组比较,A组和B组PCAF和磷酸化NF-κB p65蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);与B组比较,C组PCAF和磷酸化NF-κB p65蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).Transwell实验结果显示,与对照组比较,A组和B组穿出小室细胞数明显增多,差异有统计学意义[(766.30±40.86)个/视野、(794.00±76.36)个/视野vs (202.70±22.59)个/视野,P＜0.05];与B组比较,C组穿出小室细胞数明显减少,差异有统计学意义[(337.00±82.95)个/视野vs (794.00±76.36)个/视野,P＜0.05].免疫荧光染色实验结果显示,与对照组比较,A组和B组细胞核内NF-κB p65蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).与B组比较,C组细胞核内NF-κB p65蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 下调PCAF的表达可明显抑制VSMC迁移,其机制可能与下调PCAF后抑制NF-κB信号通路介导的炎性反应有关.
关键词：p300-CBP转录因子肌细胞平滑肌细胞运动绿色荧光蛋白质类NF-κB
资助基金：国家自然科学基金(81500228)
论文发表日期：2020-01-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 75-78 )
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