人GJB6基因表达载体的构建及鉴定
李丽娜1
张延平1
孙玉蕊1
张宗林1
王戈1
张晓强1
冯冲2
潘登科2
1.解放军第309医院耳鼻喉科,北京,1000912.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100094
摘要：目的 构建人野生型Cx30与红色荧光蛋白DsRed的融合蛋白表达载体,为揭示Cx30突变患者发病机制提供实验依据.方法 用PCR法扩增GJB6基因,将PCR产物与T载体连接,用双切酶酶切pEASY-GJB6与载体DsRed-N1,连接回收后的片断,构建野生型Cx30编码序列与PDsRed2表达载体,测序鉴定序列正确性.将GJB6-DsRed用脂质体转染HEK293细胞,荧光显微镜观察表达的融合蛋白.结果 GJB6-DsRed在HEK293细胞中高效表达,表达主要位于细胞膜中.结论 成功构建了人野生型Cx30与红色荧光蛋白DsRed的融合蛋白表达载体,为进一步研究非综合征性聋的致聋机制奠定了基础.
关键词：缝隙连接蛋白30红色荧光蛋白融合蛋白表达载体
分类号：R349.6(基础医学)
资助基金：军队"十一五"归国人员课题(06H048)国家自然科学基金(30700936)解放军第309医院课题(LCB08MS12、309-09-03)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 470-473 )
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