大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养与初步鉴定
秦贺
杨仕明
赵立东
郑贵亮
郭维维
陈光涛
翟所强
1.解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科,解放军耳鼻咽喉研究所耳神经生物中心,北京,1008532.解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科,解放军耳鼻咽喉研究所耳神经生物中心,北京,1008533.解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科,解放军耳鼻咽喉研究所耳神经生物中心,北京,1008534.解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科,解放军耳鼻咽喉研究所耳神经生物中心,北京,1008535.解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科,解放军耳鼻咽喉研究所耳神经生物中心,北京,1008536.解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科,解放军耳鼻咽喉研究所耳神经生物中心,北京,1008537.解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科,解放军耳鼻咽喉研究所耳神经生物中心,北京,100853
摘要:目的 探讨体外分离、传代培养大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的方法 ,并对培养细胞进行初步鉴定,为利用大鼠骨髓MSCs进行感音神经性聋细胞移植治疗的研究奠定基础.方法 用贴壁培养法分离大鼠骨髓细胞,第1组于24小时全量换液,第2组于24小时半量换液,第3组于3天全量换液,传代扩增.相差显微镜进行形态学观察;RT-PCR检测培养细胞表面分子表达:定向诱导培养细胞向成脂细胞、成骨细胞方向分化.结果 24小时首次全量换液组培养7天后观察见少量细胞集落,细胞形态不规则;24小时首次半量换液组培养7天后观察见较多细胞集落,细胞规则,呈梭形、椭圆形:3天首次全量换液组培养7天后观察见较多悬浮细胞,与贴壁细胞混杂在一起.培养细胞表面分子SH2、CD31、CD44呈阳性表达,但不表达CD34.第2组培养细胞传代后加入不同诱导剂定向诱导分化一定阶段,分别经油红O及yon Kossa法染色鉴定证实MSCs可分别向脂肪细胞及成骨方向分化.结论 本实验分离培养的大鼠骨髓原代细胞24小时首次半量换液培养利于大鼠骨髓MSCs的分离和纯化,可稳定表达SH2、CD31、CD44.MSCs具有多项分化潜能.
关键词:大鼠骨髓间充质干细胞分离培养细胞分化鉴定
分类号:R394.26(医学遗传学)
资助基金:国家高技术研究发展计划(863计划)(2007AA02Z150)国家自然科学基金(30730040)国家自然科学基金(30871398,30571017,30000189)海外青年学者合作研究基金(30628030)北京市自然科学基金(7042061)国家科技支撑计划(2007BAI18B12,2006BAI02B06,2007BAI18B14)
论文发表日期:2009-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 357-361 )
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