构建重组质粒检测癌基因STAT3诱导表达活性
孟令战1
刘永占2
1.河北省保定市卫生监督所,0710002.河北省卫生监督局
摘要：目的 建立基于报告基因的检测方法,检测环境因子饮用水水源有机提取物对癌基因Stat3的诱导表达活性,发现异常活化癌基因的环境致癌因子,为进一步揭示肿瘤发生发展与环境因素的相互作用关系奠定基础.方法 将Stat3特异结合序列CRP-APRE克隆到诱导表达型载体pGL2转录启始位点上游,选择氯霉素乙酰转移酶基因(CAT)作为报告基因克隆在转录启始位点下游,构建重组质粒pTKS3-CAT.转染入表达IL-6受体的人肝癌细菌HepG2中,筛选报告基因CAT表达受IL-6诱导的阳性克隆,同时用无关药物检测模型的特异性.用建立的检测方法--ELISA法检测饮用水源有机提取物对CAT表达活性的影响,检测环境因子对Stat3的诱导表达活性.结果 CAT的表达受IL-6诱导并呈现剂量依赖关系,EC50等于0.127nmol·L-1,而无关药物rhEPO不能诱导CAT表达.结论在96孔板上用ELISA法测定CAT基因的诱导表达水平,可在基因水平检测癌基因Stat3的诱导表达活性.
关键词：转录信号转导子与激活子3癌基因白介素-6报告基因环境因子
分类号：R1(预防医学、卫生学)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：2( 65-66 )
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