釉成熟蛋白真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达
魏亚红
郝建忠
孙岩
高玉光
官秀梅
1.潍坊医学院口腔医学院·口腔医学研究所,山东,潍坊,2610422.潍坊医学院口腔医学院·口腔医学研究所,山东,潍坊,2610423.潍坊医学院口腔医学院·口腔医学研究所,山东,潍坊,2610424.潍坊医学院口腔医学院·口腔医学研究所,山东,潍坊,2610425.潍坊医学院口腔医学院·口腔医学研究所,山东,潍坊,261042
摘要：目的:构建釉成熟蛋白真核表达载体peDNA3.1-Amelotin,并观察其在293T细胞中的表达情况.方法:以出生后6d的昆明小鼠下颌磨牙中提取的总RNA为模板,设计合成特异性引物,通过RT-PCR法扩增小鼠的釉成熟蛋白[Amelotin(GenelD:71421)],包括编码区全长在内的部分cDNA序列,克隆到pMD18-T克隆载体,酶切鉴定正确;然后亚克隆至pcDNA3.1真核表达载体中,双酶切鉴定及测序正确.将构建的重组载体磷酸钙法转染293T细胞,检测Amelotin的表达情况.结果:成功克隆了Arnelotin基因编码区全长序列;构建出重组真核表达载体pcDNA3.1-Amelotin,磷酸钙法转染后可检测到Amelotin基因在293T细胞中的表达.结论:构建了重组pcDNA3.1-Amelotin真核表达载体,并成功表达,为进一步研究该蛋白的生物学活性奠定了基础.
关键词：釉成熟蛋白重组真核表达载体pcDNA3.1磷酸钙法转染
分类号：R780.2(口腔病理学)
资助基金：国家自然科学基金(30672316)山东省教育厅重点项目(J06L22)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 338-341,367 )
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