青藤碱调节AMPK/mTOR/ULK1信号通路对IL-1β诱导的关节软骨细胞自噬和凋亡的影响
胡宏志
汪能
李娟
李冰
姚金龙
410005 长沙,湖南中医药大学第二附属医院骨伤四科
摘要：目的 探讨青藤碱(SN)调节单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/UNC-51样激酶1(ULK1)信号通路对白介素-1β(IL-1β)诱导的关节软骨细胞自噬和凋亡的影响.方法 将关节软骨细胞分为Control组(正常培养)、IL-1β组(10 μg/L的IL-1β诱导12 h)、L-SN、M-SN、H-SN组(在IL-1β诱导的基础上添加25、50、100 μmol/L 的 SN)、SN+Compound C 组(在 H-SN 组的基础上添加 10 μmol/L AMPK 抑制剂 Compound C).MTT法、透射电子显微镜(TEM)、流式细胞仪分别检测SN对各组关节软骨细胞增殖、自噬、凋亡的影响;ELISA试剂盒检测各组细胞中COX-2、TNF-α、MMP-3、MMP-13的表达;蛋白印迹实验(WB)检测各组细胞中p-AMPK、AMPK、p-mTOR、mTOR、p-ULK1、ULK1蛋白水平.结果 与Control组比较,IL-1β组关节软骨细胞的A490值、p-AMPK/AMPK、p-ULK1/ULK1蛋白水平降低,自噬空泡数、凋亡率、COX-2、TNF-α、MMP-3、MMP-13、p-mTOR/mTOR蛋白水平升高(P＜0.05);与 IL-1β 组比较,L-SN 组、M-SN 组、H-SN 组 A490值、自噬空泡数、p-AMPK/AMPK、p-ULK1/ULK1 蛋白水平升高,凋亡率、COX-2、TNF-α、MMP-3、MMP-13、p-mTOR/mTOR 蛋白水平降低(P＜0.05);与 H-SN 组比较,SN+Com-pound C 组 A490值、自噬空泡数、p-AMPK/AMPK、p-ULK1/ULK1 蛋白水平降低,凋亡率、COX-2、TNF-α、MMP-3、MMP-13、p-mTOR/mTOR蛋白水平升高(P＜0.05).结论 SN可以通过促进IL-1β诱导的关节软骨细胞自噬,抑制细胞凋亡,其机制可能是通过激活AMPK/mTOR/ULK1信号通路实现的.
关键词：骨关节炎青藤碱单磷酸腺苷活化蛋白激酶雷帕霉素靶蛋白UNC-51样激酶1白介素-1β关节软骨细胞自噬凋亡
分类号：R684.3(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)
论文发表日期：2024-11-18
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1379-1384,1398 )
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