红茴香提取物干预骨质疏松性大鼠骨折后的血管生成

史桂荣; 任博文; 张仲博; 王莉莎; 张啟威; 史栋梁

摘要：背景:红茴香提取物是一种具有消炎镇痛和活血化瘀等功效的中药制剂,其乙醇提取物对大鼠软组织损伤具有显著疗效,而红茴香是否对骨质疏松性骨折具有治疗效果尚未报道.目的:探讨红茴香提取物对骨质疏松性骨折大鼠血管生成的保护作用及可能机制.方法:①体内实验:应用去势法和闭合性骨折法建立骨质疏松性骨折大鼠模型.36只健康雌性SD大鼠随机选取30只分为假手术组、模型组和红茴香提取物组(建模后给予0.05 mL/kg红茴香提取物),每组10只,其余6只纳入空白对照组.采用双能X射线和三点弯曲力学试验法检测大鼠股骨骨密度值和股骨弹性段终点载荷;苏木精-伊红染色法测定骨痂组织血管数量和血管面积;ELISA法检测血清中血管内皮生长因子、碱性成纤细胞生长因子、血小板衍生生长因子和一氧化氮水平.②体外实验:对人微血管内皮细胞进行药物干预,分为对照组、红茴香提取物(50,100或200 mg/L)组、Vector+二甲基亚砜组、NRF1过表达组、LY294002(10μmol/L)组和NRF1过表达+LY294002组.MTT法检测人微血管内皮细胞增殖;Transwell法检测人微血管内皮细胞迁移率;血管生成实验检测人微血管内皮细胞血管生成;Western blot法检测人微血管内皮细胞中NRF1,PI3K,p-PI3K,AKT和p-AKT蛋白表达,ELISA法检测人微血管内皮细胞中血管内皮生长因子、碱性成纤细胞生长因子、血小板衍生生长因子和一氧化氮水平.结果与结论:①红茴香提取物改善了骨质疏松大鼠股骨骨密度和最大负荷(P<0.05),增加骨痂组织中血管数量、血管面积和血清中血管形成相关因子水平(P<0.05).②红茴香提取物能促进人微血管内皮细胞中NRF1、p-PI3K和p-AKT蛋白表达(P<0.05),促进人微血管内皮细胞增殖、迁移率、血管生成和血管形成相关因子水平(P<0.05),NRF1过表达可起到相同作用,但LY294002处理可逆转NRF1过表达的作用.③结果说明,红茴香提取物可能通过提高NRF1蛋白表达、激活PI3K/AKT信号通路,对骨质疏松性骨折大鼠血管生成起到一定的促进作用.