雌激素刺激下人牙周膜干细胞成骨分化及通路间的交叉串扰
金珂1
吴晓玲2
罗小玲1
胥鹏飞1
徐晓梅1
1.西南医科大学附属口腔医院正畸科,口颌面修复重建与再生实验室,四川省泸州市 6460002.阆中市人民医院,四川省阆中市 637400
摘要：背景:以干细胞为基础的牙周组织再生工程为牙周病治疗提供了广阔前景.雌激素诱导的人牙周膜干细胞成骨分化与Wnt信号通路息息相关.目的:探讨雌激素刺激下Wnt/β-catenin和Wnt/Ca2+信号通路对人牙周膜干细胞成骨分化的影响及通路间的交叉串扰.方法:收集牙周状态健康的前磨牙,分离纯化培养人牙周膜干细胞,流式细胞仪检测表面标志物,茜素红和油红O染色检测成骨成脂分化潜能.取第3代人牙周膜干细胞,随机分为空白组、对照组、雌激素组、XAV939(Wnt/β-catenin通路抑制剂)组、L-690,330(Wnt/Ca2+通路抑制剂)组和XAV939+L-690,330组,除空白组外,其他组均进行成骨诱导培养.qRT-PCR和Western blot检测各组成骨标志物(Runx2、OCN)及Wnt/β-catenin和Wnt/Ca2+通路关键信号分子表达;Fluo-4荧光探针检测细胞内Ca2+浓度;碱性磷酸酶试剂盒检测碱性磷酸酶活性;茜素红染色检测成骨分化能力.结果 与结论:①胶原酶消化法分离纯化培养的人牙周膜干细胞呈纺锤形、多边形,流式检测显示其表现出类似间充质干细胞的免疫表型,且具有成骨成脂分化潜能;②10-7 mol/L雌激素可上调人牙周膜干细胞内Ca2+浓度、Wnt/Ca2+通路关键信号分子CaMKII和NLK基因及CaMKII蛋白的表达;③联合使用Wnt/β-catenin和Wnt/Ca2+通路抑制剂能有效抑制细胞成骨分化;④单独使用任一通路抑制剂会上调另一通路活性,但对细胞的成骨分化无显著影响;⑤结果表明,雌激素通过Wnt/β-catenin和Wnt/Ca2+信号通路诱导人牙周膜干细胞成骨分化,且两通路间存在交互串扰,共同促进人牙周膜干细胞的成骨分化.
关键词：干细胞人牙周膜干细胞雌激素成骨分化Wnt/β-cateninWnt/Ca2+串扰通路
分类号：R459.9(治疗学)R318(医用一般科学)R394.2(医学遗传学)
资助基金：四川省科技厅项目(2021YJ0151)泸州市人民政府-西南医科大学科技战略合作项目(2020LZXNYDZ06)
论文发表日期：2022-08-21
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 3886-3891 )
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