低氧诱导因子1α联合Scleraxis修饰人羊膜间充质干细胞促进腱骨愈合的体外实验
朱喜忠1
刘子铭2
刘毅1
熊华章1
杨继滨1
李豫皖1
金瑛1
吴术红1
1.遵义医学院附属医院骨科,贵州省遵义市,5630002.重庆医科大学第一附属医院关节外科,重庆市,400000
摘要：背景:由于肌腱与骨的愈合缓慢而复杂,往往影响临床治疗效果,提高腱骨接触面细胞活性是损伤治疗的新策略.Scleraxis 是肌腱细胞的特异性标志分子,低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)可通过多种途径诱导血管和骨组织的形成.但HIF-1α能否增强Scleraxis诱导人羊膜间充质干细胞分化并用于腱骨损伤的修复还尚未研究.目的:探讨HIF-1α联合Scleraxis修饰人羊膜间充质干细胞在体外促进腱骨愈合的能力并研究其分子机制.方法:取第3代人羊膜间充质干细胞,分别经AdHIF-1α、AdScx、AdGFP和AdHIF-1α+AdScx腺病毒载体感染第3天和第7天后检测肌腱、软骨和骨组织相关基因的表达.结果与结论:①倒置相差显微镜观察显示,第3代人羊膜间充质干细胞呈长梭形、漩涡状贴壁生长;②透射电镜观察显示,人羊膜间充质干细胞呈椭圆形,结构清晰,胞浆含丰富的内质网及线粒体;③荧光显微镜观察显示,腺病毒感染24 h后,AdHIF-1α组表达红色荧光,荧光表达量约为50%,AdScx组和AdGFP组均表达绿色荧光,荧光表达量约为70%;④实时荧光定量PCR显示,感染第3天和第7天时,AdHIF-1α+AdScx组、AdHIF-1α组和AdScx组Ⅰ型胶原、Fibronectin、RUNX2、VEGF和ALP的mRNA表达量均高于AdGFP组(P < 0.05),AdHIF-1α+AdScx组Ⅰ型胶原、Fibronectin、RUNX2、VEGF和ALP的mRNA表达量均显著性高于AdScx组(P < 0.05);⑤荧光免疫组化分析显示,AdHIF-1α+AdScx组感染第7天时Ⅰ型胶原表达量高于感染第3天;⑥结果表明,体外HIF-1α和Scleraxis基因联合修饰后可促进人羊膜间充质干细胞表达肌腱细胞、软骨细胞和骨细胞的标志分子,具有促进腱骨愈合的能力.
关键词：低氧诱导因子1α人羊膜间充质干细胞Scleraxis腱骨愈合韧带组织工程干细胞
分类号：R318(医用一般科学)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 113-118 )
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