诱导型多能干细胞在体外三维环境中诱导分化出肠道类器官
李向阳1
赵鑫1
相小松1
郑鹏1
惠璜2
嵇武1
1.南京大学医学院附属金陵医院,解放军南京军区南京总医院解放军普通外科研究所,江苏省南京市 2100022.解放军第二军医大学,上海市,200433
摘要：背景:诱导型多能干细胞是一类特殊的细胞,具有自我更新及多向分化潜力,在一定诱导条件下能够分化为肠道类器官.目的:探究诱导型多能干细胞在体外特定条件下是否可分化出肠道类器官.方法:复苏B6J小鼠18代诱导型多能干细胞,培养3 d克隆单位覆盖培养皿80％左右后,加入含有激活素A的培养基培养3 d,得到确定性内胚层,加入含成纤维细胞生长因子4和Wnt3A的培养基培养4 d,得到中后肠细胞球,将其与Matrigel培养基混合后滴入四孔板形成滴株样生长,在HEPES、Rspondin1、头蛋白、表皮细胞生长因子、B27添加剂等生长因子等共同作用下向肠道类器官分化,期间观察细胞形态变化,检测确定性内胚层FoxA2、Sox17表达,中后肠细胞球特异性标记物CDX2表达,肠道类器官特异性标记物Sox9、CGA、MMP7表达.结果与结论:①诱导型多能干细胞在含有激活素A的培养基培养3 d,细胞初步分化,相互融合,确定性内胚层标记物FoxA2、Sox17表达较诱导型多能干细胞明显升高(P<0.05);②确定性内胚层在含成纤维细胞生长因子4和WNT3A环境下培养第3天开始就有少量中后肠细胞球形成,第4天大量中后肠细胞球形成,中后肠细胞球标记物CDX2较确定性内胚层明显升高(P<0.05);③中后肠细胞球培养3 d后逐渐形成肠道类器官,其特异性标记物Sox9、CGA、MMP7表达明显高于中后肠细胞球(P<0.05);④结果表明,诱导型多能干细胞可在体外三维环境中诱导分化出类肠道器官.
关键词：干细胞分化诱导型多能干细胞定向分化体外培养确定性内胚层肠道类器官
分类号：R394.2(医学遗传学)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 4057-4061 )
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