超顺磁氧化铁纳米颗粒标记人端粒酶反转录酶基因修饰神经干细胞及体外MRI成像
窦文广
岳军艳
胡莹
吴清武
陈杰
1.新乡医学院第一附属医院放射科,河南省新乡市,4531002.新乡医学院第一附属医院放射科,河南省新乡市,4531003.新乡医学院第一附属医院放射科,河南省新乡市,4531004.新乡医学院第一附属医院放射科,河南省新乡市,4531005.新乡医学院第一附属医院放射科,河南省新乡市,453100
摘要:背景:细胞标记与体外MRI成像联合,可无创性活体标记移植的神经干细胞存在部位、存在方式及其一些生物学特性。<br>  目的:探讨超顺磁氧化铁纳米颗粒(SPIO)标记对人端粒酶反转录酶(hTERT)基因修饰神经干细胞生物学特性的影响及标记后MR成像效果。<br>  方法:体外培养大鼠骨髓来源的神经干细胞,将其分为正常神经干细胞组、SPIO标记神经干细胞组、SPIO标记空载病毒组及SPIO标记hTERT转染组。采用电穿孔法将pcDNA3-hTERT 重组质粒转染至神经干细胞,并进行SPIO标记,当神经干细胞标记成功后即行4.7T MR扫描,流式细胞仪、MTT法检测细胞周期、细胞增殖能力,RT-PCR和Western blot检测hTERT基因和蛋白的表达。<br>  结果与结论:①普鲁士蓝染色显示SPIO对神经干细胞的标记率为97%;②MRI成像显示,与正常神经干细胞组相比,SPIO标记神经干细胞组的T2及T2*弛豫时间均显著下降,相应的弛豫率则显著升高(P<0.01);③与正常神经干细胞比较,SPIO标记的3组神经干细胞增殖能力相比明显增强,处于G0-G1及S期的比例明显增多;④与SPIO标记神经干细胞组、SPIO标记空载病毒组比较,SPIO标记hTERT转染组hTERT mRNA及蛋白的表达均明显增强;⑤结果表明,在体外超顺磁性氧化铁能够高效标记神经干细胞,经hTERT基因修饰后能够稳定表达hTERT基因,细胞增殖能力显著增强,4.7T MR仪能够对标记后的细胞有效进行体外成像。
关键词:干细胞培养神经干细胞氧化铁标记超顺磁性氧化铁粒子hTERT基因修饰磁共振成像
分类号:R394.2(医学遗传学)
论文发表日期:2016-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 6821-6826 )
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中国组织工程研究

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北大核心CSTPCD
ISSN:2095-4344
年,卷(期):2016,20(45)
所属栏目:技术与方法 -- 干细胞培养与分化