无血清悬浮培养肾癌干细胞表面标志CD133及端粒酶活性的表达
潘鹏
田福起
郭涛
孙浩
马克钧
周留正
1.江苏大学附属医院泌尿外科,江苏省,镇江市,2120012.江苏大学附属医院泌尿外科,江苏省,镇江市,2120013.江苏大学附属医院泌尿外科,江苏省,镇江市,2120014.江苏大学附属医院泌尿外科,江苏省,镇江市,2120015.江苏大学附属医院泌尿外科,江苏省,镇江市,2120016.江苏大学附属医院泌尿外科,江苏省,镇江市,212001
摘要：背景:有研究表明端粒酶活性抑制剂不仅能抑制或杀死肾癌细胞,而且对决定肾癌发生发展的干细胞也有作用.目的:观察无血清悬浮培养的肾癌干细胞表面标志CD133及端粒酶活性的表达情况,并与含血清培养的肾癌细胞作比较.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-0612009-02在江苏大学完成.材料:手术切除肾癌周围新鲜的正常肾组织标本由江苏大学附属医院提供,肾癌干细胞株OS-RC-2由上海中科院细胞库提供.方法:取处于对数生长期的肾癌干细胞OS-RC-2,胰酶消化后离心弃上清,悬浮于含EGF、bFGF的DMEM,F12无血清培养基中,调整细胞浓度为2×10~5L~(-1)进行接种,在37℃、体积分数为5%的CO_2培养箱中悬浮培养.以含血清培养的肾癌细胞及正常肾组织细胞作为对照.主要观察指标:倒置显微镜下观察细胞生长情况,流式细胞仪检测肾癌干细胞CD133及CD34的表达,采用TRAP实时定量检测肾癌干细胞端粒酶活性.结果:肾癌干细胞接种于无血清培养基后,细胞呈圆形悬浮于培养液中:2 d后有细胞球生成,每个细胞球含3～8个细胞,折光性较强;7 d后细胞球明显增多,体积增大,为规则的圆形或卵圆形.无血清悬浮培养的肾癌干细胞球CD133~+CD34~-率明显高于含血清培养的肾癌细胞CD133~+CD34~-率,正常肾组织细胞未测出有CD133及CD34的表达,3者间比较差异有显著性意义(F=328.25,P<0.05).肾癌干细胞球和肾癌细胞端粒酶活性均高于正常肾组织细胞(F=278.74,P<0.05),而前2者间端粒酶活性无明显差异.结论:与含血清培养的肾癌细胞相比,无血清悬浮培养的肾癌干细胞表面标志CD133呈明显高表达,二者端粒酶活性均高于正常肾组织.
关键词：肿瘤干细胞肾癌端粒酶活性CD133
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：镇江市科技局资助项目(SH2007024)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 5286-5290 )
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