RNA干扰抑制DLL4基因表达对人血管内皮细胞增殖的影响
李文林1
石小玉2
刘弘晟3
周莹2
熊丽霞4
赵林3
1.南昌大学医学院,病理生理学教研室,江西省南昌市330006;南昌大学医学院,江西省医学科学研究所医学生物高技术重点实验室,江西省南昌市3300062.南昌大学医学院,组织学与胚胎学教研室,江西省南昌市3300063.南昌大学医学院,江西省医学科学研究所医学生物高技术重点实验室,江西省南昌市3300064.南昌大学医学院,病理生理学教研室,江西省南昌市330006
摘要：背景:Delta-like 4(DLL4)是近年新发现的血管生长调控因子,研究表明抑制DLL4可导致过度无效的血管生成.目的:研究RNA干扰抑制DLL4基因表达对人血管内皮细胞增殖的影响.设计、时间及地点:随机分组,对比观察,于2007-07/2008-09在南昌大学医学院和江西省医学生物高技术重点实验室完成.材料:人微血管内皮细胞由上海细胞生物和生物化学研究所提供.方法:设计和化学合成靶向DLL4基因的siRNA序列,lepofectamineTM2000介导DLL4 siRNA转染人微血管内皮细胞.提取细胞总RNA,进行反转录-聚合酶链反应扩增,琼脂糖电泳检测DLL4 mRNA.提取细胞总蛋白,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳.采用四甲基偶氮唑盐法检测DLL4 siRNA对人微血管内皮细胞增殖的影响,实验分4组:①85 nmol/LDLL4 siRNA-duplex组.②85 nmol/L DLL4 siRNA-scrambled阴性对照组.③lepofectamine组.④未经处理组.主要观察指标:RNA干扰后,人微血管内皮细胞DLL4的转录和蛋白表达及人微血管内皮细胞的增殖.结果:反转录-聚合酶链反应和Western blot实验结果显示,人微血管内皮细胞转录DLL4和表达DLL4蛋白;85 nmol/LDLL4siRNA完全抑制人微血管内皮细胞DLL4转录和DLL4蛋白的表达.DLL4 siRNA抑制人微血管内皮细胞DLL4表达的有效浓度为85 nmol/L.四甲基偶氮唑盐实验结果显示,85 nmol/L DLL4 siRNA-duplex组的细胞增殖率为190.00%,未经处理组的细胞增殖率为110.00%.结论:人微血管内皮细胞表达DLL4,DLL4 siRNA抑制人微血管内皮细胞表达DLL4并促进人微血管内皮细胞增殖.DLL4对人微血管内皮细胞增殖具有抑制作用.
关键词：DLL4人微血管内皮细胞RNA干扰细胞增殖
分类号：R349.33(基础医学)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 4700-4703 )
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