非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳及银染法临床应用探讨
胡卫华
李铁臣
孙惠兰
1.241001,安徽省芜湖市皖南医学院遗传医学研究室2.241001,安徽省芜湖市皖南医学院遗传医学研究室3.241001,安徽省芜湖市皖南医学院遗传医学研究室
摘要:目的:建立一种省时简便和灵敏可靠的检测筛查基因点突变的方法,即 PCR- SSCP(PCR- Single strand conformation polymorphism)银染分析技术. 方法:应用改进的 PCR- SSCP银染分析技术,检测妊娠期胆内胆汁淤积症患者外周血基因组 DNA中 MDR3基因外显子 14的点突变情况. 结果:非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳在有冷水循环装置控制下,结果稳定可靠,受环境温度影响小;但银染时,需根据室温调整染色时间及显影液的配制,当室温高于 25℃时,碳酸钠需预冷,有利于控制背景色,得到更为满意的结果. 结论:利用非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳及银染法筛查目的基因的点突情况,具有省时简便和灵敏可靠的特点,且重复性好,避免了盲目测序及资金浪费.
关键词:基因聚合酶链反应电泳聚丙烯酰氨凝胶多态现象单链构象银染色法点突变
分类号:R4(临床医学)
论文发表日期:2005-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 425-427 )
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实用医学杂志

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北大核心CSTPCD
ISSN:1006-5725
年,卷(期):2005,21(4)
所属栏目:检验与临床