猪干扰素-γcDNA的克隆和原核表达
韩柱1
侯小康2
1.华北制药集团新药研究开发有限公司,河北,石家庄,0500152.河北中润制药有限公司,河北,石家庄,050046
摘要：目的 克隆猪的干扰素-γcDNA,并进行原核表达,以实现猪干扰素-γ的大量生产.方法 收集转染细胞(CHO-PCI-neo-PoIFNγ),用UNIQ-10柱式Trizol总RNA抽提试剂盒提取总RNA,并通过RT-PCR的方法扩增获得猪干扰素-γcDNA基因.将获得的猪干扰素-γcDNA基因克隆入原核表达载体pBV220中,组装成原核表达载体pBV220-cPoIFNγ.将这个表达载体转化入大肠杆菌表达菌株DH5α和BL21中,温度诱导培养后,进行SDS-PAGE实验检测.结果 特异表达带约在17KD的位置,并证实在菌株DH5α和BL21中的表达量没有明显的差异,其表达量都约占细菌总蛋白的15%.结论 成功地进行了猪的干扰素-γcDNA,并进行原核表达,为猪干扰素-γ的大量生产提供了可能.
关键词：猪干扰素γRT-PCR原核表达载体
分类号：TQ460.38(制药化学工业)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 240-242 )
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