Let-7a-5p靶向整合素αV调节气道平滑肌细胞转化生长因子β1表达和活化
闻康
郭佳
倪凯
杨崇鑫
罗明志
邓林红
常州大学药学院&医学院(筹),生物医学工程与健康科学研究院,常州213164
摘要:为探究微小RNA(microRNA,miRNA)let-7 a-5 p对气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)转化生长因子β1(transformation growth factorβ1,TGFβ1)表达和活化的影响,本研究使用生物信息学方法预测let-7 a-5 p靶基因,构建含靶基因3′-UTR段的双荧光素酶报告载体,验证其活性;随后采用let-7 a-5 p模拟物和抑制剂分别增加和降低ASMCs胞内let-7 a-5 p表达,检测TGFβ1的表达以及分泌.预测显示,let-7a-5p靶向整合素αV(integrinαV,ITGAV)基因3′-UTR.构建含ITGAV基因3′-UTR序列双荧光素酶报告质粒、凝胶电泳和基因测序.结果表明,质粒重组成功.Let-7 a-5 p模拟物显著降低荧光素酶活性和ITGAV基因mRNA表达,提示let-7 a-5 p靶向ITGAV基因3′-UTR.Let-7 a-5 p模拟物显著降低ASMCs胞内TGFβ1的mRNA表达,但增加胞外TGFβ1含量.Let-7 a-5 p通过靶向ITGAV基因降低ASMCs胞内TGFβ1表达,但促进胞外TGFβ1活化,提示let-7 a-5 p可能通过靶向ITGAV促进TGFβ1活化参与气道结构和功能的调控.
关键词:微小RNA气道炎症气道细胞炎症因子整合素信号双荧光素酶报告实验
分类号:R318(医用一般科学)R734.1(呼吸系肿瘤)R734.2(呼吸系肿瘤)
资助基金:国家自然科学基金(12072048)国家自然科学基金(31670950)国家自然科学基金(11532003)湖南省高新技术产业科技创新引领项目(2020SK2018)
论文发表日期:2022-06-25
在线出版日期:2026-09-11(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:7( 122-128 )
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生物医学工程研究

生物医学工程研究

CSTPCD
ISSN:1672-6278
年,卷(期):2022,41(2)
所属栏目:论著