利用荧光共振能量转移技术检测基质刚度对细胞外调节蛋白激酶信号的调控
周颖
邓林红
欧阳明星
徐华栋
常州大学药学院&医学院(筹) ,生物医学工程与健康科学研究院,常州213164
摘要:体内细胞周围的基质刚度参与调控细胞的一系列反应,如基因表达、干细胞分化、胞内生化信号活动等.本研究利用荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)技术实时检测细胞中细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)的活性变化,研究基质刚度的调控作用.当气道平滑肌(ASM)细胞培养在不同刚度的聚丙烯酰胺凝胶基质上,ERK活性与刚度呈正相关性;在较软的基质上活性相对较低,其结果没有显著地受到胞内Src激酶和Myosin收缩力信号的影响.根据细胞通过黏着斑接触基质,实验检测发现黏着斑的形态受到刚度的明显影响,培养在玻璃上时呈典型的斑点状和短直线状,在软的凝胶上呈不规则的形状或弯曲的线条状,且有随凝胶刚度下降而不规则比率增加的趋势.结果显示,基质刚度可能通过黏着斑介导的细胞黏附力调节胞内生化信号.
关键词:基质刚度聚丙烯酰胺凝胶细胞外调节蛋白激酶荧光共振能量转移细胞黏着斑
分类号:R318(医用一般科学)
资助基金:国家自然科学基金(21672027)国家自然科学基金(11532003)江苏省自然科学基金(BK20181464)
论文发表日期:2021-09-25
在线出版日期:2026-09-11(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:8( 273-280 )
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