人线粒体 DNA 基因表达谱芯片的制备及鉴定
孙恒文1
胡义德2
曾子君1
潘燚1
方良毅1
谭佩欣1
曾向伟3
1.广东省人民医院 广东省医学科学院 肿瘤中心放疗科,广州,5100802.第三军医大学附属新桥医院全军肿瘤中心,重庆,4000373.广东医学院附属彭湃纪念医院肿瘤科,广东 海丰,516400
摘要：研制人线粒体 DNA（mitochondrial DNA，mtDNA）表达谱芯片，鉴定芯片的特异性和稳定性，完善芯片的制备和使用程序，优化实验参数，为线粒体功能研究提供物质基础及技术保障。以人 mtDNA 剑桥序列为标准，设计 mtDNA 编码的13种 mRNA、2种 rRNA 和9种 tRNA 基因及蛋白产物定位于线粒体的核 DNA （nDNA）编码的5种凋亡相关基因寡核苷酸探针。芯片点样仪点制芯片，进行荧光显示和洗脱，用其检测人宫颈癌上皮 Hela 细胞和人肾小管上皮 Hc1细胞 cDNA 文库 mtDNA 编码基因及 nDNA 编码凋亡相关基因的差异表达情况。所点制的芯片扫描结果显示，样点分布均匀、清晰，规整度好，无漏点、连点。cDNA 文库杂交鉴定结果显示，整张芯片荧光信号均匀一致，背景清晰，各基因重复样点杂交结果一致，各质控点能正常显示。成功制备了人 mtDNA 基因表达谱芯片，完善了该芯片的制备和使用程序，通过初步应用，证明所研制的人 mtDNA 基因表达谱芯片具有特异性高、稳定性好等优点，可用于不同组织或细胞样本 cDNA 文库 mtDNA基因的差异表达分析。
关键词：线粒体 DNA基因表达寡核苷酸芯片信使 RNA核糖体 RNA转运 RNA
分类号：R378(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家自然科学基金(81302033)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2026-09-11（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 164-169 )
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