重组双链及单链腺相关病毒介导Exendin －4表达效率的比较
王俊红1
问姣2
董鹏1
张静1
焦杨1
郭永红3
1.西安交通大学医学院第二医院内分泌科,西安,7100042.西安交通大学医学院第二医院肿瘤科,西安,7100043.西安交通大学医学院第二医院感染科,西安,710004
摘要：比较双链腺相关病毒（Double －stranded adeno －associated virus，dsAAV）及单链 AAV（Single －stranded adeno －associated virus，ssAAV）介导 Exendin －4分泌表达效率。应用基因工程方法构建 dsAAV ／pSSHG／Exendin －4，与重组 ssAAV 比较转染 NIH3T3细胞效率及转染后细胞上清 Exendin －4浓度，免疫组化检测 Exendin －4表达。经限制性内切酶及测序证实载体构建成功，测定重组 dsAAV pSSHG／Exendin －4滴度为2．5×1011 pfu，较重组 ssAA 滴度高（2．5×109 pfu）；dsAAV ／pSSHG／GFP 转染 NIH3T3细胞表达绿色荧光强；ELISA 法检测感染重组 dsAAV 的 NIH3T3细胞上清中 Exendin －4的浓度为181．1±8．75pmol ／ml，较重组 ssAAV 分泌浓度（133．81±8．09pmol ／ml）升高（P ＜0．05）；重组 dsAAV 及 ssAAV 转染 NIH3T3细胞Exendin －4表达均为阳性。重组 dsAAV 可分泌表达 Exendin －4并较 ssAAV 具有更高效转染能力，为研究Exendin －4功能及应用于临床打下基础。
关键词：Exendin-4双链AAV单链AAV糖尿病腺相关病毒
分类号：R587.1(内分泌腺疾病及代谢病)
资助基金：国家自然科学基金(81100300)西安交通大学自由探索与自主创新类项目(Xjj20100018)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2026-09-11（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 122-127 )
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