超声靶向微泡破碎介导EGFP基因转染肝癌细胞的影响因素研究
李银鹏
朱惠明
张园
王娜
王菲
黄庆娟
1.暨南大学附属第二临床医学院消化内科,深圳,5180202.暨南大学附属第二临床医学院消化内科,深圳,5180203.暨南大学附属第二临床医学院消化内科,深圳,5180204.暨南大学附属第二临床医学院消化内科,深圳,5180205.暨南大学附属第二临床医学院消化内科,深圳,5180206.暨南大学附属第二临床医学院消化内科,深圳,518020
摘要:观察超声靶向微泡破碎(ultrasound targeted microbubble destruction,UTMD)在不同转染条件和细胞状态下对肝癌细胞HepG2转染率及细胞活性的影响.体外培养HepG2细胞,随机分为4组:质粒组、微泡+质粒组、超声+质粒组和超声+微泡+质粒组,各组再分为贴壁和悬浮状态2组.悬浮状态的超声+微泡+质粒组根据质粒和微泡浓度不同分为微泡浓度组和质粒浓度组,转染24h后在倒置荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白在HepG2细胞中的表达,流式细胞仪测定细胞转染率,MTT法检测细胞活性.结果 在超声声强2w/cm2、占空比20%、照射时间60s的超声参数作用下,质粒5μg/ml、微泡:细胞20∶1时,悬浮状态细胞转染率为7.33%±0.98%,存活率为90.37%±1.80%贴壁状态细胞转染率为1.56%±0.81%,存活率为81.10±1.26%,两者比较有显著差异(P<0.01).悬浮状态下,提高质粒和微泡浓度至质粒10 μg/ml、微泡:细胞40∶1时转染效率增至15.63%±1.81%,且细胞生存率>80%.结论 相同转染条件下悬浮状态细胞转染率及存活率明显优于贴壁状态.优化质粒、微泡浓度可进一步提高超声微泡介导的基因转染效率和存活率.
关键词:超声靶向微泡破碎HepG2细胞EGFP基因转染率存活率
分类号:R318(医用一般科学)
论文发表日期:2012-01-01
在线出版日期:2026-09-11(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 99-102,106 )
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