人线粒体DNA荧光定量PCR检测方法的建立
王学波
李建远
1.青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院中心实验室,山东烟台,2640002.青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院中心实验室,山东烟台,264000
摘要：建立SYBR Green I实时荧光PCR定量检测人线粒体DNA的方法.选取人线粒体DNA高度保守基因片段,将该基因片段与pCF-T载体连接后,转化入E.coli DH5a,提取重组质粒PCR及测序鉴定后,作为阳性模板建立SYBR-Green I荧光定量PCR标准曲线和熔解曲线.结果表明:构建的标准曲线线性关系良好(反应体系中含101～108拷贝时,扩增反应CT值与拷贝数的对数成线性关系),相关系数为0.997.批内和批间重复性测定的变异系数分别为1.23%～3.29%以及3.10%～5.21%.我们成功建立了实时荧光定量PCR检测人线粒体DNA的方法,该方法可作为进一步研究线粒体DNA的方法,在相关疾病诊断和监测中具有一定的应用前景.
关键词：SYBR Green I荧光定量PCR线粒体DNA聚合酶链反应人
分类号：R318(医用一般科学)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2026-09-11（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 298-301 )
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