人骨形成蛋白2基因克隆及真核表达载体的构建
郭勇
张西正
李娜
赵红斌
曾强成
1.军事医学科学院卫生装备研究所,天津,3001612.军事医学科学院卫生装备研究所,天津,3001613.军事医学科学院卫生装备研究所,天津,3001614.军事医学科学院卫生装备研究所,天津,3001615.军事医学科学院卫生装备研究所,天津,300161
摘要:在大肠杆菌中克隆人骨形成蛋白2基因并获得真核表达载体.由人成骨瘤细胞中提取总RNA,利用逆转录PCR方法扩增获得人骨形成蛋白2基因cDNA;将此基因片段重组到pGEM-T克隆载体中,转化到大肠杆菌DH5α后, 蓝白斑筛选阳性克隆,利用限制性酶切、PCR扩增和核苷酸序列分析鉴定重组质粒; 将pGEM-T克隆载体中人骨形成蛋白2基因重组到pcDNA3.1真核表达载体中,用限制性酶切和PCR扩增鉴定重组质粒.结果表明:重组在两种质粒中的基因片段为人骨形成蛋白2基因全编码序列.克隆获得人骨形成蛋白2基因,并得到此基因的真核表达载体,为人骨形成蛋白2的表达打下了基础.
关键词:骨形成蛋白2基因克隆真核表达载体
分类号:Q781(基因工程(遗传工程))R318(医用一般科学)
资助基金:国家自然科学基金(10172093)
论文发表日期:2004-01-01
在线出版日期:2026-09-11(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 133-136 )
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