采用噬菌体展示技术筛选玉米赤霉醇的单链抗体
张晴晴1
张晓1
程罗根2
刘媛3
唐敏4
刘贤进3
1.南京师范大学生命科学学院;江苏省农业科学院食品质量安全检测研究所2.南京师范大学生命科学学院3.江苏省农业科学院食品质量安全检测研究所4.盐城工学院化学与生物工程学院
摘要：目的 从噬菌体单链抗体库中筛选玉米赤霉醇(ZER)的阳性克隆.方法 人工抗原ZER-BSA作为包被原,采用负筛选,经过连续3轮固相"亲和-洗脱-富集"筛选,富集了噬菌体抗体库中阳性克隆的比例,同时采用Trypsin和ZER竞争洗脱2种洗脱方法.ELISA鉴定阳性克隆,运用SDS-PAGE方法对大肠杆菌分泌蛋白进行了时问条件的摸索.结果 随着淘洗轮数的增加,特异性噬菌体抗体得到了高度富集,从6个96孔板的克隆中筛选到10株阳性克隆(阳性大于阴性3倍视为阳性克隆),将菌株转换成功的5株测序发现有4株不同的阳性克隆,对一株进行了原核系统的表达,SDS-PAGE确定了目的 条带的存在,相对分子质量为Mr28 000.结论 为在天然噬菌体抗体库中制备玉米赤霉醇的抗体奠定了基础.
关键词：噬菌体抗体库单链抗体玉米赤霉醇
分类号：Q2(细胞生物学)
资助基金：国家自然科学基金(30471155)国家高技术研究发展计划（863计划）(2006AA068411)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 718-721 )
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