人死亡受体5全长基因的构建及转染胶质瘤细胞
庄国洪1
黎之静1
孟庆宇1
陈彩霞1
王娟1
李文珠1
张佳锴1
朱迅2
1.厦门大学医学院抗癌研究中心2.吉林大学基础医学院免疫教研室
摘要：目的 构建人死亡受体5(death receptor 5,DR5)全长基因真核细胞表达载体pcDNA3.1/DR5,pcDNA3.1/GFP/DR5,并观察其转染胶质瘤细胞U138的效果.方法 通过重叠PCR获得DR5全长编码序列,构建pcDNA3.1/GFP/DR5,pcDNA3.1/DR5表达载体,利用脂质体转染试剂盒,分别将2种质粒pcDNA3.1/GFP/DR5、pcDNA3.1/GFP共转染胶质瘤细胞U138,转染后72 h,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测DR5mRNA的表达,流式细胞术检测DR5的表达强度、检测Anti-DR5对胶质瘤细胞U138生长的影响.结果 获得了DR5全长编码序列,成功瞬时转染U138,RT-PCR、流式细胞术检测结果表明,转染后U138细胞DR5 mRNA、蛋白水平的表达明显增加,Anti-DR5可以明显抑制U138细胞的生长.结论 获得了DR5全长编码序列,探索到成功转染DR5的最佳方法,为稳定筛选高表达DR5的U138细胞提供依据.
关键词：胶质瘤转染DR5基因构建
分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 591-595 )
英文信息