人MASP1和MASP2 C端片段的原核表达
蔡学敏
赵娜
张丽芸
左大明
陈政良
1.南方医科大学免疫学教研室2.南方医科大学免疫学教研室3.南方医科大学免疫学教研室4.南方医科大学免疫学教研室5.南方医科大学免疫学教研室
摘要：目的 在大肠杆菌中表达人甘露聚糖结合凝集素(MBL)相关丝氨酸蛋白酶1、2(MASP1、MASP 2)C端片段.方法 采用PCR技术从分别含人MASP1、MASP 2 cDNA的质粒pGEM-MASP1、pGEM-MASP2中扩增MASP1、MASP2 C端基因片段,将其插入原核表达载体pET17b,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达MASP1、MASP2 C端蛋白,通过Ni2+-NTA亲和层析柱纯化目的 蛋白,以SDS-PAGE、Western blot和ELISA进行鉴定.结果 分别从pGEM-MASP1和pGEM-MASP2中扩增到约1 300 bp的基因片段,构建成重组表达载体,经酶切出现约3 300 bp和1 300 bp片段,测序结果与预期的完全一致.纯化蛋白经SDS-PAGE可见Mr40 000蛋白带,该蛋白可与抗His抗体反应.结论 获得了重组人MASP1和MASP2 C端片段蛋白及其表达菌株,为MASP分子的进一步研究提供了条件.
关键词：甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶1、2C端片段原核表达
分类号：R392.1(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30371310)广东省自然科学基金研究团队项目(015003)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 577-580 )
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