VEGF189基因合成、原核表达及鉴定
陈丹1
王宏1
朱中松1
向军俭1
杨琴2
赵鑫1
邓宁1
1.暨南大学分子免疫学与抗体工程研究中心2.广州铭康生物工程有限公司
摘要：目的 获得编码VEGF189蛋白的基因,并通过原核表达系统表达VEGF189融合蛋白.方法 应用SOE PCR技术合成VEGF189基因,克隆入pET-32a(+)原核表达载体,转化E coli BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE和Western blot检测,表达产物经HisTrapTM HP亲和柱层析纯化,测定蛋白浓度.结果 DNA测序分析表明,合成的VEGF189基因与文献报道相一致.在大肠杆菌BL21(DE3)中表达的Trx-VEGF189融合蛋白,以包涵体和可溶2种形式存在.表达产物可被兔抗鼠VEGF多抗特异识别.经HisTrapTM HP亲和柱纯化,获得纯度达85%的融合蛋白.结论 成功合成VEGF189基因,并在原核表达系统中获得高表达,为研制高效抗肿瘤的VEGF抗体和疫苗奠定了前期基础.
关键词：VEGF189SOE PCR原核表达
分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)
资助基金：广州市科技攻关计划重点项目(2006Z2-EA051)国家重点实验室开放基金(51206001)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 469-472 )
英文信息