抗重组幽门螺杆菌VacA单克隆抗体的制备
张绍兰
杨致邦
毛小琴
田一玲
黄进
邓颖
1.重庆医科大学病原生物学教研室,重庆,4000162.重庆医科大学病原生物学教研室,重庆,4000163.重庆医科大学病原生物学教研室,重庆,4000164.重庆医科大学病原生物学教研室,重庆,4000165.重庆医科大学病原生物学教研室,重庆,4000166.重庆医科大学病原生物学教研室,重庆,400016
摘要：目的 制备抗重组幽门螺杆菌致细胞空泡毒素抗原(VacA)的单克隆抗体(mAb).方法 用基因工程菌pQr30-v-DH5α大最表达重组蛋白VaeA,经Ni2+-NTA树脂纯化后,Western blot鉴定抗原性,免疫家兔后ELISA法检测血清VacA抗体鉴定其免疫原性.用重组vacA免疫Balb/c小鼠.取免疫鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/O细胞融合,HAT选择性培养和间接EIJSA进行筛选,并检测所分泌抗体的效价和分析Ig类别.结果 获得4株能稳定分泌VacA mAb的杂交瘤细胞,能分泌IgG2b、lgM和IgG1 3类抗体,轻链均为k型.其中,IgG1 mAb经Western blot鉴定能与重组VacA发牛特异性反应.结论 应用纯化的重组VacA,成功获得了能稳定分泌幽门螺杆菌VacA单克隆抗体的杂交瘤细胞,并制备了单克隆抗体.为进一步研制检测VacA的试剂盒及探讨VacA的致病机制奠定了基础.
关键词：幽门螺杆菌致细胞空泡毒索单克隆抗体酶联免疫吸附试验
分类号：R378.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：重庆市卫生局基金(99-2029)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 100-104 )
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