抗TNF-α人单链抗体的分离纯化及鉴定
王欲晓
周丽君
王大鹏
乔媛媛
王琰
1.海军总医院中心实验科,北京,1000372.海军总医院中心实验科,北京,1000373.海军总医院中心实验科,北京,1000374.海军总医院中心实验科,北京,1000375.海军总医院中心实验科,北京,100037
摘要：目的 对通过大容量抗体库中筛选到的4株抗TNF-α人单链抗体进行分离纯化及鉴定.方法 采用硫氰酸盐洗脱ELISA法评估阳性克隆的亲和力;亲和层析柱纯化抗体;通过ELISA检测抗体的特异性结合活性;用1929细胞检测其体外中和TNF-α的活性.结果 用硫氰酸盐洗脱法测定4个噬菌体抗体的相对亲和力与其相应的可溶性抗体相对亲和力相一致;SDS-PAGE电泳结果表明,单链抗体得到成功纯化;ELISA结果表明,纯化的抗体能够特异性结合人TNF-α;体外中和试验证明筛选到的单链抗体能中和TNF-α对1929细胞的毒性.结论 从人源大容量噬菌体抗体库中能够筛选到具有中和活性的抗TNF-α人单链抗体.
关键词：单链抗体TNF-α纯化
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：北京市自然科学基金(5052025)军队医药卫生一般专项(06Z007)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 700-702 )
英文信息