重组腺相关病毒介导的PD-L1基因在大鼠移植肝中的表达
邵永1
董家鸿1
王槐志1
王曙光1
别平1
李晓武1
张玉君1
陈永文2
倪兵2
1.第三军医大学西南医院全军肝胆外科研究所,重庆,4000382.第三军医大学全军免疫学研究所,重庆,400038
摘要：目的 探讨供肝转染PD-L1-AAV2一RFP后基因的表达情况.方法 近交系BN大鼠随机分3组:同基因肝移植组(ISO组)、腺相关病毒空载体组(1AAV组)、基因转染组(PD-L1组),每组6对.ISO组供肝冷保存期经门静脉注射生理盐水2 mL,保存2 h后采用改良"二袖套法"行原位肝移植;AAv、PD-L1组所用灌注液分别为AAV2-RFP空病毒颗粒和PD-L1-AAV2-RFP(1×1011v.g./只).术后7、14 d各取3只大鼠采血测定肝功能,取肝组织即刻行冰冻切片在荧光显微镜下观察RFP的表达,免疫组化染色法检测PD-L1蛋白的表达.结果 3组术后7 d谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)均明显增高,14 d后基本恢复正常,各组问相比均无显著性差异(P>0.05);术后7 d在荧光显微镜下AAV、P、D-L1组移植肝可见少量而微弱的红色荧光,14 d可见高亮度的红色荧光,而各组肝外组织及ISO组各时段均未见红色荧光;免疫组化染色结果示未转染组PD-L1蛋白均微弱表达,而PD-L1转染7 d后随时间延长靶基因表达逐渐增强(P<0.05).结论 重组腺相关病毒介导,体外冷保存期经门静脉途径供肝转染PD-L1,可以使PD-L1基因在肝内获得安全、有效的表达.
关键词：程序性死亡配体-1腺相关病毒-2肝移植基因转染大鼠
分类号：R653.7(外科学各论)
资助基金：国家自然科学基金(30400418)重庆市自然科学基金重点项目(CSTC,2005BA5004)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 678-680,683 )
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