PDZ1-腺病毒重组体的构建及其对KA诱导的海马神经元凋亡的拮抗作用
胡书群
纵艳艳
侯筱宇
张光毅
1.徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心江苏省脑病生物信息重点实验室,江苏徐州,2210022.徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心江苏省脑病生物信息重点实验室,江苏徐州,2210023.徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心江苏省脑病生物信息重点实验室,江苏徐州,2210024.徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心江苏省脑病生物信息重点实验室,江苏徐州,221002
摘要：目的 构建PSD-95结构域PDZ1与腺病毒重组体并观察其对海人藻酸(KA)诱导的海马神经元凋亡的作用.方法 采用RT-PCR法获得PDZ1的cDNA;与腺病毒穿梭载体pAdTraek-CMV用T4 DNA连接酶连接;连接产物与骨架载体pAdEasy-1共转染至原核包装细胞BJ5183;将原核重组体用脂质体转入真核包装细胞293H;纯化包装后的病毒颗粒并测定其滴度;腺病毒感染培养的海马神经元,加入KA,用DAPI染色后荧光显微镜观察细胞凋亡;用流式细胞仪定量分析细胞凋亡率.结果 ①经RT-PCR得到了PDZ1的cDNA;②电泳鉴定得到原核重组体;③得到包装完整的具感染能力的病毒颗粒;④纯化的病毒颗粒滴度为1.08×109 ifu/mL⑤病毒表达的PDZ1使KA诱导的海马神经元凋亡数量减少(P<0.05).结论 获得了能表达PDZ1-GFP的病毒颗粒,并且PDZ1过表达能拮抗KA诱导的海马神经元凋亡.
关键词：PDZ1腺病毒载体KA海马神经元凋亡
分类号：R743.31(神经病学与精神病学)
资助基金：国家自然科学基金(30330190)江苏省高校自然科学基础研究基金(07KJB310118)徐州医学院科研基金(07KJ15)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 651-655 )
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