抗人甘露聚糖结合凝集素(MBL)单克隆抗体的制备、鉴定与检测方法的建立
骆鹏1
孟淑芳1
张庶民1
贾天军2
1.中国药品生物制品检定所,北京,1000502.河北北方学院医学检验中心,河北,张家口,075029
摘要:目的 制备抗甘露聚糖结合凝集素(MBL)的单克隆抗体(McAb),建立免疫学检测方法.方法 以纯化MBL为抗原,免疫Ualb/c小鼠,制备单克隆抗体,鉴定其特性,建立并验证夹心ELISA定量检测法.结果 筛选出2株稳定分泌抗MBL的单抗杂交瘤细胞株,免疫球蛋白亚类均为IgG1.两单抗间抑制率<50%,结合位点不同两单抗特异识别MBL.选择包被抗体B10浓度为8μg/mL,酶标抗体B3稀释度为1:500,建立夹心EIJSA定量检测法.该法检出范围为1~100 μg/mL,与其他抗原无交叉反应.重复性试验的批内批间变异均小于10%,回收率在101%~103%之间,cv小于7%.检测结果与国外试剂盒比较无显著差异.结论 制备的抗MBL单克隆抗体可用于MBL的免疫学检测.
关键词:甘露聚糖结合凝集素单克隆抗体ELISA
分类号:R392.11(医学免疫学)
资助基金:国家高技术研究发展计划(863计划)(2003AA2Z3509)
论文发表日期:2008-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 579-582,587 )
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