HpaA IgY抑制小鼠胃内幽门螺杆菌的定植
黄进1
秦思栋1
杨致邦1
黄伟2
邓颖1
叶翠莲1
1.重庆医科大学基础医学院病原生物学教研究室,重庆,4000162.西南大学荣昌校区动物医学系,重庆,402460
摘要：目的 在构建基因工程菌pQE30-HpaA-DH5a的基础上,制备HpaA重组蛋白,以此为抗原,制备抗HpaA的蛋黄抗体(HpaA IgY).通过小鼠口服试验,验证HpaA IgY阻止H.pylori在胃内定植的作用,为研制预防H.pylori感染的制剂奠定基础.方法 大量诱导工程菌pQE30-HpaA-DH5a,获得重组蛋白Hpan,免疫产蛋立克体鸡,以水稀释法联合硫酸铵沉淀法提纯LgY,SDS-PAGE分析纯度,Bradford法测定浓度,Western blot鉴定对相应抗原的特异性,ELISA法检测效价.建立H.pylori感染Balb/c小鼠的动物模型,预防组在小鼠灌喂H.pylori菌液前灌喂不同剂量的HpaA LgY.组织学检查和细菌培养观察H.pylori定植.结果 提纯后的HpaA IgY纯度为90%,浓度为24.6 mg/mL,Western blotting证实有良好抗原结合特异性,ELISA效价为1:12 800.阳性对照组H.pylori的感染率为70.4%,12周后的感染率为88.9%.预防组的感染率明显低于阳性对照组,随IgY剂量的增加,感染率降低.IgY的剂量为6 mg/mL时,能达到预防效果.结论 成功制备出高纯度、高浓度、高效价的特异性HpaAIgY,在小鼠体内能阻止H.pylori的定植,有望进一步开发成为预防H.pylori感染的制剂.
关键词：幽门螺杆菌黏附素蛋黄抗体体内试验
分类号：R392.12(医学免疫学)
资助基金：重庆市教委渝教科重庆市科委基金(2003-7-3;CSTC,2005EA5020)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 522-526 )
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