猪囊尾蚴AgB基因的克隆表达及其免疫学特性分析
郭爱疆
才学鹏
海岗
窦永喜
贾万忠
骆学农
张少华
景志忠
1.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,兰州,7300462.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,兰州,7300463.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,兰州,7300464.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,兰州,7300465.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,兰州,7300466.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,兰州,7300467.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,兰州,7300468.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,兰州,730046
摘要：目的 克隆猪囊尾蚴 AgB 基因并在大肠杆菌中表达,为研制猪囊尾蚴病诊断试剂和基因工程疫苗奠定基础.方法 从猪囊尾蚴虫体中提取总 RNA,利用反转录聚合酶链式反应及重叠延伸 PCR 法扩增 AgB 完整序列,并克隆到原核表达载体 pGEX-4T-1,在大肠杆菌中诱导表达.通过 SDS-PAGE、Western-blotting检测AgB的表达和免疫反应活性.通过对包涵体的洗涤、纯化及变复性研究,纯化目的蛋白.采用ELISA法检测纯化蛋白检出猪囊尾蚴阳性血清率和免疫小鼠血清中抗猪囊尾蚴抗体的水平.结果 测序证实扩增出AgB基因序列并正确插入到原核表达载体.表达质粒在大肠杆菌BL21中高效表达.纯化的目的蛋白,具有良好的抗原性和免疫原性.结论 成功扩增了全长AgB基因并得到了高效表达,纯化了具有免疫性的重组蛋白,为进一步开展AgB的诊断试剂和重组疫苗研究奠定了基础.
关键词：猪囊尾蚴 AgB 基因原核表达纯化
分类号：S852.734(动物医学（兽医学）)
资助基金：国家高技术研究发展计划"863"资助项目(200BAA241111)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 515-518 )
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