人TLR2和TLR4胞外区cDNA的克隆
孙守勋
李强
刘静
白晓
蒲晓允
1.第三军医大学附属新桥医院检验科,重庆,4000372.第三军医大学附属新桥医院检验科,重庆,4000373.第三军医大学附属新桥医院检验科,重庆,4000374.第三军医大学附属新桥医院检验科,重庆,4000375.第三军医大学附属新桥医院检验科,重庆,400037
摘要:目的 从脂多糖诱导的外周血单个核细胞克隆人Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)胞外区cDNA.方法 用不同浓度脂多糖在不同时间刺激单个核细胞后提取总RNA,RT-PCR方法半定量测定TLR2和TLR4的表达,应用pUCm-T载体克隆胞外区cDNA,双酶切以及DNA测序进行鉴定.结果 单个核细胞在四种浓度脂多糖刺激3 h,6 h和12 h后.TLR2和TLR4表达并不相同.15 μg/mL脂多糖作用6 h TLR2表达最高,10 μg/mL脂多糖作用3 hTLR4表达最高.经RT-PCR扩增TLR2和TLR4胞外区cDNA分别为1 700 bp和1 900 bp,T载体克隆、酶切鉴定及测序分析后证实,目的 片段与GenBank中序列一致.结论 脂多糖的诱导对外周血单个核细胞TLR2和TLR4表达有显著影响,并且成功克隆了胞外区cDNA.
关键词:TLR2TLR4LPS单个核细胞胞外区基因表达
分类号:R392.11(医学免疫学)
资助基金:全军"十一五"面上项目(20068060)"创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室"开放基金(2006B-2)
论文发表日期:2008-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 464-466,469 )
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免疫学杂志

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北大核心CSTPCD
ISSN:1000-8861
年,卷(期):2008,24(4)
所属栏目:技术与方法