HPV16,18,58-mE67重组腺病毒的构建及克隆表达
杨峥嵘
马原栋
万骏
郑义
王海峰
赵洁
彭扬洋
罗海波
羊东晔
黄来强
1.清华大学深圳研究生院生物医药研究中心,广东,深圳,5100852.清华大学深圳研究生院生物医药研究中心,广东,深圳,5100853.清华大学深圳研究生院生物医药研究中心,广东,深圳,5100854.清华大学深圳研究生院生物医药研究中心,广东,深圳,5100855.清华大学深圳研究生院生物医药研究中心,广东,深圳,5100856.清华大学深圳研究生院生物医药研究中心,广东,深圳,5100857.清华大学深圳研究生院生物医药研究中心,广东,深圳,5100858.清华大学深圳研究生院生物医药研究中心,广东,深圳,5100859.清华大学深圳研究生院生物医药研究中心,广东,深圳,51008510.清华大学深圳研究生院生物医药研究中心,广东,深圳,510085
摘要：目的 构建能同时表达HPV16,18,58三亚型E6-E7优化融合基因的重组腺病毒,为下一步获得适合国情的宫颈癌HPV三价治疗性候选疫苗打基础.方法 常规扩增、构建HPV16,18,58的E6-E7融合基因,PCR定点突变消除其转化活性后以IRES相连并重组入pAdeno-X腺病毒载体系统;体外细胞、软琼脂培养及裸鼠成瘤实验检测突变基因转化活性去除情况;重组腺病毒电击转染293包装细胞,Western blot分析外源基因表达情况.结果 三型重组融合基因序列与设计完全一致,其中突变基因的转化活性显著降低,Western blot等显示所构建重组腺病毒在293细胞中高效表达外源基因.结论 成功构建表达HPV16,18,58三型E6-E7融合基因的重组腺病毒,并有效消除了其转化活性,为下一步疫苗研发打下了基础.
关键词：人乳头瘤病毒腺病毒转化活性
分类号：R394.6(医学遗传学)R392.11(医学免疫学)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 459-463 )
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