鼠A20基因的腺病毒载体构建及耳蜗毛细胞表达
袁伟1
张学渊1
侯春丽2
魏勇1
朱楚洪2
1.第三军医大学,西南医院耳鼻咽喉科,重庆,4000382.第三军医大学,解剖学教研室,重庆,400038
摘要：目的 构建鼠锌指蛋白A20基因的重组腺病毒载体,并观察其对豚鼠耳蜗毛细胞的感染情况.方法 采用基因工程技术,经亚克隆后将A20基因片段克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,利用pAdEasy系统进行细菌内同源重组后,脂质体转染HEK293细胞包装、扩增,将重组腺病毒感染耳蜗毛细胞.PCR方法对重组体腺病毒进行鉴定,利用穿梭质粒中带有绿色荧光蛋白GFP报告基因对病毒滴度和感染情况进行监测.结果 酶切鉴定及PCR结果表明A20基因重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度达5×109pfu/mL,并对耳蜗毛细胞有很强的感染能力.结论 应用细菌内同源重组法成功构建了含鼠A20基因的重组腺病毒载体.
关键词：腺病毒A20基因同源重组
分类号：Q343(遗传学分支学科)Q344.1(遗传学分支学科)Q939.4(微生物分类学（系统微生物学）)R-332(实验医学、医学实验)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 337-339,345 )
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