抗丙酮酸脱氢酶复合体E2亚基单克隆抗体的制备与鉴定
刘莉1
鞠艳芳1
杨金菊2
柳晓兰3
高媛2
王婉4
刘蓉1
曲海霞5
陈志成1
刘莹2
高建恩3
孙启鸿3
1.军事医学科学院放射与辐射医学研究所免疫学研究室,北京,1008502.北京蛋白质组研究中心抗体工程研究室,北京,1022063.军事医学科学院放射与辐射医学研究所免疫学研究室,北京,100850;北京蛋白质组研究中心抗体工程研究室,北京,1022064.山东师范大学生命科学学院,济南5.第二军医大学东方肝胆医院,上海,200438
摘要：目的 制备抗人丙酮酸脱氢酶复合体E2亚基(pyruvate dehydrogenase complex E2,PDC-E2)的单克隆抗体(mAb)并进行初步鉴定.方法 将正常成人肝组织匀浆离心并分离线粒体,用线粒体总蛋白免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术制备mAb,并通过间接ELISA法、Western blot及免疫组化的方法对mAb进行特性鉴定,通过免疫沉淀联合质谱、Uni-ZAP XR肝脏cDNA表达文库筛选鉴定抗原.结果 获得1株可稳定分泌抗人PDC-E2 mAb 的杂交瘤细胞系.mAb的Ig亚类(型)为IgG1(κ), 该mAb可用于ELISA检测、Western blot、免疫组化和免疫沉淀实验.结论 成功制备了抗人PDC-E2的mAb,为PDC-E2的研究提供了有力的工具.
关键词：PDC-E2单克隆抗体线粒体
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：国家科技攻关计划(2004BA711A20)国家重点基础研究发展计划（973计划）(2001CB510208)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 90-92 )
英文信息