重组腺病毒HIV-1 vpr基因的构建和表达
贺芳
曾耀英
王通
吴晓萍
季煜华
林长乐
1.暨南大学组织移植与免疫实验室,广州,5106322.暨南大学组织移植与免疫实验室,广州,5106323.暨南大学组织移植与免疫实验室,广州,5106324.暨南大学组织移植与免疫实验室,广州,5106325.暨南大学组织移植与免疫实验室,广州,5106326.暨南大学组织移植与免疫实验室,广州,510632
摘要：目的 构建携带HIV-1 vpr基因的重组腺病毒,使CD4+T淋巴细胞C8166内源性的高表达Vpr蛋白.方法 利用AdEasy-1系统, 通过将含有目的 基因片段的穿梭载体pAdTrack-CMV-vpr和骨架质粒pAdEasy-1在BJ5183细菌内同源重组的方法构建重组腺病毒质粒Ad-vpr, 用脂质体法将重组质粒转染至HEK293A细胞包装, 获得重组腺病毒Ad-vpr, 荧光显微镜观察Ad-vpr感染C8166细胞GFP的表达 , Western blotting鉴定Vpr在C8166细胞内的特异性表达,流式细胞术检测Ad-vpr感染 C8166细胞的效率.结果 成功构建携带HIV-1 vpr基因的重组腺病毒 ,Western blotting结果表明重组腺病毒Ad-vpr感染的C8166细胞内源性的高表达Vpr 蛋白,流式细胞术检测结果表明Ad-vpr感染C8166细胞效率高(44.07±3.62)%.结论 成功构建出携带HIV-1 vpr基因的重组腺病毒,使C8166细胞内源性的高表达Vpr蛋白.
关键词：重组腺病毒HIV-1 vpr基因C8166细胞
分类号：R363(病理学)
资助基金：国家重点基础研究发展计划（973计划）(2006CB504200)国家重点基础研究发展计划（973计划）(2004CB720102)广东省自然科学基金(5300413)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 86-89 )
英文信息