猫过敏原白蛋白的克隆表达、纯化和免疫学特性鉴定
许卓谦1
刘志刚2
朱建琪2
1.深圳大学过敏反应与免疫学研究所,深圳,518060;广州花都区人民医院急诊科,广州,5108002.深圳大学过敏反应与免疫学研究所,深圳,518060
摘要：目的 克隆、表达猫过敏原白蛋白(Fel d 2),并分析其过敏原活性.方法 提取猫肝脏总RNA,逆转录合成cDNA,采用适宜引物进行PCR扩增目的 基因,随后将其克隆到原核表达载体PET24a(+),在大肠杆菌中进行表达,镍亲和柱层析法提纯重组蛋白,Western blot检测其过敏原活性.结果 序列分析表明所克隆白蛋白的序列由1 752 bp组成,编码584个氨基酸,与Genebank上的基因序列(NM 001009961)同源性为99.9%.SDS-PAGE显示表达的重组白蛋白Mr65 000.免疫印迹表明重组白蛋白具有与猫过敏原过敏病人血清IgE结合活性.结论 表达的重组白蛋白具有与猫过敏患者血清IgE结合活性.
关键词：猫过敏原白蛋白克隆表达免疫学鉴定
分类号：R392.8(医学免疫学)
资助基金：广东省科技计划(2003A3080502)广州市科技攻关计划(2002Z2-E4021)深圳市科技计划(200326)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 456-458,461 )
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