免疫磁珠法分离人外周血CD4+CD25+调节性T细胞
牛微
杨曌
尚小云
傅晓岚
唐艳
黎万玲
姜曼
王莉
吴玉章
1.第三军医大学全军免疫学研究所,重庆,4000382.第三军医大学全军免疫学研究所,重庆,4000383.第三军医大学全军免疫学研究所,重庆,4000384.第三军医大学全军免疫学研究所,重庆,4000385.第三军医大学全军免疫学研究所,重庆,4000386.第三军医大学全军免疫学研究所,重庆,4000387.第三军医大学全军免疫学研究所,重庆,4000388.第三军医大学全军免疫学研究所,重庆,4000389.第三军医大学全军免疫学研究所,重庆,400038
摘要：目的 建立人外周血单个核细胞中CD4+ CD25+ 调节性T细胞(regulatery T cells,Treg)免疫磁性细胞分离力(megnetic activated cell sorting,MACS),并鉴定其分离效率.方法 采用免疫磁珠两步法(即阴性分选和阳性分选2步)分离人周血单个核细胞中的CD4+ CD25+ 调节性T细胞,首先采用生物素标记的鸡尾酒抗体和抗生物素标记的磁珠阴性分选CIM细胞,再用抗CD25+ 的磁珠阳性分选CD4+ CD25+ T细胞.分离后的细胞经抗体染色后再通过流式细胞仪检测其分离纯度;内因子染色检测其转录因子FOXV3的表达频率;台盼蓝染色检测细胞的存活率;3H-TdR掺入法检测其对CD4+ CD25-T细脆殖抑制效应.结果 阴性分选CD4+ T细胞的纯度为(92.2±1.7)%,阳性分选后CD4+ CD25+ Treg细胞的纯度(95.1±1.2)%.胞内因子染色FOXF3在CD4+ CD25+ Treg细胞中的表达率为(80.4±1.2)%,台盼蓝染色细胞存活率为(95.6±3.3)%.3H-TdR掺入法检测其对CIM+ CD25-T细胞具有明显的抑制作用.结论 采用免疫磁性细胞分离技术能够高效、快地得到一群纯度高并且细胞活力好的CD4+ CIY25+ Treg,为进一步研究其功能提供了方便.
关键词：磁性细胞分离CD4+CD25+调节性T细胞FOXF3表达
分类号：R392(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30400437)国家自然科学基金(30371329)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 449-451,455 )
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