sH-2Kd肽复合物的构建及多克隆抗体的制备
杨新星
郝友华
张正茂
宋娜
杨东亮
1.华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室,武汉,4300302.华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室,武汉,4300303.华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室,武汉,4300304.华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室,武汉,4300305.华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室,武汉,430030
摘要：目的 构建可溶性的H-2Kd肽复合物,并制备抗MHC-I(H-2Kd)分子多克隆抗体.方法 原核高效表达的sH-2Kd-BSP和β2m蛋白,在抗原肽(乙型肝炎病毒的核心蛋白HBc131-139)的存在下,体外复性折叠成可溶性的H-2Kd-β2m-抗原肽复合物单体,经BirA酶作用并通过凝胶过滤层析法纯化复合物单体.应用纯化的该复合物单体免疫C57BL/6小鼠制备多克隆抗体.结果 ①Western blot检测显示获得了生物素化的sH-2Kd-HBe复合物单体.②Western blot检测显示抗MHC-I(H2Kd)分子多克隆抗体与复合物单体有很好的抗原抗体反应;Balb/C小鼠脾脏冰冻切片的免疫组化结果:在细胞膜表面见棕色着色.③Dot-ELISA检测该多克隆抗体的滴度可以达到1:3 200.结论 成功构建了具有完整构象的生物素化sH-2Kd-HBc复合物单体,制备了抗MHC-I(H-2Kd)分子多克隆抗体.
关键词：sH-2Kd-β2m-抗原肽复合物多克隆抗体
分类号：R392(医学免疫学)
资助基金：国家重点基础研究发展计划(973计划)(20014CB510008)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 436-439 )
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