用反向遗传技术产生冷适应致弱的重组A型人流感病毒的研究
杨鹏辉1
颜艳1
罗德炎1
邢丽1
刘秀梵2
王希良1
1.军事医学科学院微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京,1000712.扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室,江苏,扬州,225009
摘要：目的 以鸡胚高度适应株A/PR/8/34株为重组流感病毒骨架,利用反向遗传技术拯救冷适应致弱的重组A型人流感病毒.方法 对冷适应、温度敏感、减毒的A/Ann Arbor/6/60(H2N2)流感病毒株的PB2基因片段,进行了全基因序列合成,同时人工引入PB2265(N265S)氨基酸的突变.PB2基因片段通过与改造后的转录/表达载体pAD3000连接,构建PB2基因的拯救载体.该重组质粒与PR8进行"7+1"组合的病毒拯救,共转染COS-1细胞.结果 经测序获得序列准确的拯救质粒pMDV-A-PB2,利用反向遗传技术成功拯救出了具有血凝性(1×25)的冷适应的重组A型流感病毒.结论 利用反向遗传技术成功拯救冷适应致弱的重组A型人流感病毒,该系统为深入研究甲型人流感病毒的基因功能和新型疫苗研发奠定了基础.
关键词：流感病毒反向遗传技术cDNA重组病毒
分类号：R183.3(流行病学与防疫)
资助基金：国家科技攻关计划(2004BA519A70)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 335-338 )
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