小鼠FGFR3可控性RNAi载体的构建和抑制效率验证
张宜华
苏楠
杜晓兰
赵玲
陈林
1.第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤实验室,重庆,4000422.第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤实验室,重庆,4000423.第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤实验室,重庆,4000424.第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤实验室,重庆,4000425.第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤实验室,重庆,400042
摘要:目的 构建小鼠成纤维细胞生长因子受体3(fibroblast growth factor receptor 3,FGFR3)可控性RNAi载体及RNAi载体,并在体外验证后者效率.方法 以含有pLoxPneo基因的pBSK/U6载体为骨架,首先构建针对FGFR3的可控性RNAi载体pBSU6/FGFR3i,然后经Cre重组酶去除neo基因后得到RNAi载体FGFR3-RNAi.将FGFR3-RNAi与FGFR3表达载体分别共转染RAW264.7和HEK293T细胞株,经半定量RT-PCR和Western blot分别检测FGFR3 mRNA和蛋白表达情况.结果 成功构建针对FGFR3的可控性敲低载体和RNAi载体;FGFR3载体在细胞水平可明显降低FGFR3 mRNA的丰度及蛋白表达.结论 为进一步获得FGFR3可控性敲低的小鼠模型奠定基础.
关键词:成纤维细胞生长因子受体3RNAi可控性敲低
分类号:R394.3(医学遗传学)
资助基金:国家重点基础研究发展计划(973计划)(2005CB522604)国家自然科学基金(30425023)国家自然科学基金(30530410)科技计划(CSTC2004BA5016)
论文发表日期:2007-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 331-334 )
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免疫学杂志

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北大核心CSTPCD
ISSN:1000-8861
年,卷(期):2007,23(3)
所属栏目:技术与方法